弧菌顯色平板的使用經驗分享
弧菌顯色平板是一種應用十分廣泛的培養基,用于水產品及食物中毒樣品中弧菌特別是副溶血性弧菌的分離和鑒定。
檢驗原理:
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發酵的糖類;抑菌劑抑制大部分非弧菌細菌,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;混合色素與副溶血性弧菌、霍亂弧菌和創傷弧菌所對應的酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在淡黃色平板上產生品紅色菌落(副溶血性弧菌)和綠-藍綠色的菌落(霍亂弧菌和創傷弧菌)。
弧菌顯色平板的實驗內容:
1.稱量→溶化→調pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4.過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
弧菌顯色平板注意事項:
1.使用瓊脂糖需要加溫,請做好必要的防護措施,避免燙傷。
2.強烈建議您不要將瓊脂糖粉末直接倒入沸水中,這樣做會引起爆沸,濺出,致使濃度下降,還會造成結塊而融化困難。正確的做法是稱量一定量瓊脂糖至三角瓶中,根據配制濃度加入一定量的緩沖液(與電泳緩沖液),加蓋硅膠塞(防止溫度差別造成表面結膜),微波或其他方式加熱至沸騰2分鐘左右,戴手套小心取出,搖勻,使之*溶解。
3.保證瓊脂糖*溶解,否則造成電泳條帶不清,保證*溶解的前提下,盡量縮短加熱時間。